HSV感染的診斷要依據(jù)病史、臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果而定。有不潔性交史，而且在生殖器部位出現(xiàn)皮膚紅斑和原發(fā)性水皰，易復(fù)發(fā)等不難診斷。必要時(shí)可作皰液涂片，培養(yǎng)、接種、免疫熒光檢查。血清免疫抗體測(cè)定等，均有助于診斷和確定病毒類型。
 
    一、細(xì)胞學(xué)方法

    對(duì)皮損刮片做Wright-Gemsa （Tzanck試驗(yàn)）或Papanicolaou染色，可檢出HSV感染特征的巨細(xì)胞包函體，但不能區(qū)別HSV感染或水痘 — 帶狀皰疹病毒感染，敏感性僅為病毒分離的60%。

    二、培養(yǎng)法

    從水皰底部取材做組織培養(yǎng)分離病毒，為目前較敏感、特異的檢查方法，需5-10天，因其技術(shù)條件要求高，價(jià)格昂貴，不能普遍使用。

    三、抗體檢測(cè)

    目前廣泛的是HSV-2抗體檢測(cè)，如蛋白印跡法也可用gD2作抗原檢測(cè)HSV-2抗體，具有敏感性，且能區(qū)分HSV-1和HSV-2的優(yōu)點(diǎn)。

    四、基因診斷

    （一）用PCR分型檢測(cè)單純皰疹病毒

    PCR是一種敏感性高，特異性強(qiáng)的快速檢測(cè)方法，標(biāo)本中含有1fg HSV-DNA就可以檢出，其在HSV感染的診斷研究中發(fā)展較快，且分型檢測(cè)HSV是發(fā)展的趨勢(shì)。

    1、標(biāo)本采集和處理

    （1）標(biāo)本采集

    ①腦脊液：直接無(wú)菌采取患者0.5ml腦脊液標(biāo)本于無(wú)菌試管送檢.如肉眼可見(jiàn)血色,應(yīng)離心取上清。

    ②羊水及嬰兒血清: 同上,應(yīng)避免溶血.

    ③腦組織: 腦組織尸檢、活檢標(biāo)本, 加1ml PBS標(biāo)本緩沖液研磨后，待檢。

    ④眼及皮膚病灶分泌物：用預(yù)測(cè)（半干）棉拭子直接取患處分泌物， 置1ml PBS標(biāo)本緩沖液中送檢。

    ⑤生殖器（宮頸、陰道、外陰、陰莖）標(biāo)本：先用消毒棉拭子擦去病變部位表面粘液、污垢，再用預(yù)潮棉拭子用力擦拭患處分泌物，置1ml PBS標(biāo)本緩沖液中送檢。

    （2）標(biāo)本處理

    ①預(yù)處理：所有液體標(biāo)本均可直接進(jìn)行模板制備；可以取100μl標(biāo)本液，離心5000 r/ min×5min后，去上清，取沉淀物進(jìn)行模板制備。

    ②模板制備：a: 蛋白酶K消化裂解法：沉淀物加100μl蛋白酶K消化裂解液，55℃1 h后，煮沸10 min，離心5000 r/ min×5min，收集上清。 b: 水煮法：沉淀物加100μl蒸餾水，搖均水煮20 min，離心5000 r/ min×5min收集上清。c: 1%Triton  X-100裂解法:取采集的標(biāo)本液100μl，加入1μl Triton  X-100，水煮20 min，5000 r/ min×5min，收集上清。d: 5%NP-40裂解法：取采集的標(biāo)本液100μl，加5μl NP-40，水煮20 min ，5000 r/ min×5min收集上清。e: 如標(biāo)本溶血嚴(yán)重經(jīng)上述裂解處理后，再加等體積酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀DNA，加10μl DW溶解待檢。

    2、PCR擴(kuò)增

    （1）引物設(shè)計(jì)。以HSV DNA聚合酶的高保守區(qū)為檢測(cè)靶序列以確保特異性。設(shè)計(jì)3個(gè)引物，一個(gè)上游共同性引物，DNAP5（5′ATGGTGAAAACATCGACATGTACGG3′）：二個(gè)下游特異性引物，DNAP3-1（5′CCTCGCGTTCGTCCTCGTCCTCC3′　）和DNAP3-2（5′CCTCCTTGTCGAGGCCCCGAAAC3′），可以分別擴(kuò)增出HSV-1 469bp DNA片段（1981～2359）、HSV-2 391bp片段（1561～1953）：從二型PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中設(shè)計(jì)了一個(gè)不分型的特異性探針HSVP3  5 ‘GGCGTAGTAGGCGGGGATGTCGCG 3‘）。

    （2）PCR實(shí)驗(yàn)體系。取模板10μl： DNAP5  0.5（0.2μmol/L）：DNAP3-1 0.5μl (0.2μmol/L)：DNAP3-2  0.5μl (0.2μmol/L)：4×dNTP 8μl(4×200μmol/L)：10×dNTP 8μl(4×200μmol/L)；10×緩沖液10μl：DMSO 4μl；加DW 65.5μl； 石蠟油 30μl.。